Лабораторные исследования. Собаку укусил клещ — пироплазмоз (бабезиоз): первые признаки, последствия. Пироплазмоз у собак: симптомы, лечение, профилактика

Знание первичных симптомов опасного заболевания поможет быстрее отреагировать на ситуацию и спасти четвероногого друга от летального исхода. Симптомы могут быть поведенческими и физиологическими. Давайте узнаем о них более подробно.

Если собаку укусил лесной клещ, являющий переносчиком заболевания, то начальные симптомы пироплазмоза у животного можно наблюдать уже в течении первых суток после укуса.

Период развития и сложность протекания болезни напрямую зависит от

1. Породных особенностей собаки.
2. Возраста и общего состояния её здоровья.
3. Была ли сделана .
4. Ранее перенесённого пироплазмоза.

С приходом весеннего сезона каждый владелец собак серьёзно обеспокоен вопросом защиты своего питомца от .

Своевременно выявленные симптомы пироплазмоза и качественно проведённое лечение гарантируют быстрое выздоровление собаки, а его последствия минимальными.

Первые признаки

После обнаружения на теле собаки клеща не нужно сию минуту бежать к ветеринару. Не исключено, что клещ не был заразным и собаке опасность не грозит.

Необходимо в течении нескольких дней следить за поведением животного и не оставлять его надолго без присмотра.

Протекает с разной степенью активностью, но его первичные симптомы всегда одинаковы:

1. Собака становится апатичной и вялой, много лежит.
2. Отказывается от активных игр и прогулок.
3. Наблюдается ухудшение аппетита, отказ от .
4. Дыхание становится частым, язык высунут.
5. Появляется рвота и диарея (каловые массы могут иметь кровянистые выделения), иногда бывает запор.
6. Моча меняет цвет на более тёмный (бурый, цвет тёмного пива, красноватый).
7. Повышается температура тела до 42 С.

Первая (начальная) стадия развития пироплазмоза самая лёгкая, но на ней собаке требуется медикаментозное лечение. Упущенное время может строить жизни вашему питомцу.

Вторичные симптомы

Если на первичной стадии больному животному не оказано, то его состояние стремительно и значительно ухудшается, а пироплазмоз переходит во вторую стадию развития. Обычно это случается спустя 2 или 3 дня после проявления первых симптомов болезни и выглядит следующим образом:

1. Слизистые оболочки пасти, глаз приобретают красноватый, желтый или синеватый оттенок.
2. Желтизна заметна за зубах.
3. Сердцебиение становится частым, но слабо прослушивается.
4. Дыхание затруднённое, одышка.
5. Отказ от пищи.
6. Снижение либо полное отсутствие двигательной деятельности.
7. Шаткая походка, потеря координации.
8. Задние конечности слабые.
9. Наблюдаются судорожные подёргивания.
10. Парализация конечностей полная либо частичная.

Вторая стадия пироплазмоза очень опасна. Смерть обычно наступает на 3-4 сутки, реже организм животного способен бороться с пироплазмозом до 7 суток.

Не допустите проявление вторичных симптомов пироплазмоза и помните о том, что на стадии парализации конечностей исход положительного лечения вашего четвероного друга практически равен нулю.

Анализы

Для эффективного лечения пироплазмоза собаке требуется сдать анализы. Зачем это нужно?

Дело в том, что иные заболевания (чума, лептоспироз, гломерулонефрит) могут иметь похожие симптомы и только лабораторные исследования крови и мочи позволят правильно оценить критичность ситуации.

Общий и клинический анализ крови

Для проведения собаке анализа (мазка) на пироплазмоз требуется забор капиллярной (периферической) крови, которую берут из уха (либо из лапы) через маленький надрез.

Венозная кровь животного не является показательной, так как наличие в ней возбудителя пироплазмоза говорит о последней стадии болезни, которое лечению не поддаётся.

Анализ крови на пироплазмоз у собак является обязательным мероприятием. Не допускайте лечения без проведения анализов.

Анализ мочи

Лабораторное исследование мочи при симптомах, указывающих на заражение собаки пироплазмозом направлено на определение уровня гемоглобина и билирубина (токсичного производного).

Как говорилось ранее цвет мочи собаки имеет бурый цвет, что уже указывает на протекание болезни. Если цвет мочи нормального цвета, а гемоглобин не обнаружен, то делается повторный анализ (через 12-24 часа). При современном лечении цвет мочи может не меняться.

Анализ крови при пироплазмозе у собак является прямым, а анализ мочи- косвенным.

Их лабораторное исследование помогает назначить животному верный курс лечения и точнее рассчитать дозы вводимых медикаментозных препаратов.

Пироплазмозом (или бабезиозом, что одно и то же). Болезнь протекает у животных крайне тяжело, пугающе часты случаи летальных исходов, еще чаще пес превращается в инвалида. А потому крайне важен анализ крови при пироплазмозе у собак. Он – залог быстрой диагностики.

Первый тип характеризуется развитием следующих клинических признаков:

• Резкое повышение , лихорадка постоянного типа.
• Через несколько дней температура может резко упасть, отчего некоторые животные погибают.
• В моче больного животного много гемоглобина (гемоглобинурия) и белка.
• Смерть наступает от сильнейшей интоксикации, собака к этому времени находится в предкоматозном состоянии, температура ее тела падает до критически низких значений (иногда она опускается ниже 35° по шкале Цельсия).

Соответственно, хронический тип болезни во многом противоположен острому ее течению:

• Температура повышается далеко не всегда, не сильно, и на пару суток максимум.
• В моче больного питомца при этом крайне редко бывает , содержание белка тоже чаще всего умеренное.
• В отличие от острого типа, хронический пироплазмоз практически всегда характеризуется сильным и прогрессирующим (но медленно) истощением.
• Также для «долгоиграющей» разновидности характерно развитие , которой при остром течении бабезиоза почти не бывает.

Читайте также: Понос у щенка: все возможные причины, лечение (препараты), питание, профилактика

Следует обратить внимание заводчиков на несколько важных фактов:

Во-первых, главная опасность пироплазмоза – не сами пироплазмы (как ни удивительно), а их токсины. Именно они вызывают обширную интоксикацию , именно эти вещества выводят из строя почки и печень, а также вызывают множество неврологических нарушений.

Во-вторых, все существующие вакцины против пироплазмоза заражения не предотвращают, а лишь облегчают течение самой болезни. Так происходит оттого, что вакцины эти – по факту, являются антитоксинами. Они помогают организму заболевшей собаки справиться с интоксикацией быстро и без особых потерь.

Общий анализ крови

Сперва нужно сказать, что общий анализ крови по сути, является единственным способом диагностики пироплазмоза в нашей стране. Так что от качества его проведения напрямую зависит своевременный и точный диагноз.

В острых случаях пироплазмоза кровь даже в пробирке кажется глубоко измененной, бледной и водянистой.

Основной признак пироплазмоза – сильно замедленная коагуляция (процессу мешают токсины пироплазм).

Отстоявшаяся сыворотка по цвету практически не отличается от самой крови, так как сильно насыщенна гемоглобином из разрушившихся эритроцитов. Соответственно, при наличии желтухи сыворотка приобретает красновато-желтый цвет. В некоторых случаях (из-за обилия желчных кислот) можно заметить зеленоватый оттенок. Заметим также, что пироплазмозе значительно ускоряется СОЭ. В общем-то, это легко объяснимо: многие эритроциты разрушены, а потому и сама структура крови не позволяет ей длительно оставаться однородной.

Читайте также: Энтероколит у собак - признаки и лечение воспаления кишечника

Принимая во внимание, что количество эритроцитов у здоровой собаки составляет 5,2-8,4* 10^12, пироплазмоз заметить очень просто. При этом заболевании количество красных кровяных телец снижается быстро и очень сильно.

То же самое можно сказать и о процентном количестве гемоглобина (в норме у собаки до 170 г на литр). В ветеринарной периодике описаны случаи, когда количество эритроцитов снижалось до 2,-2,6* 10^12 всего за несколько дней.

В наиболее же тяжелых ситуациях (и, как правило, незадолго до смерти собаки) количество эритроцитов у нее падало до 1-1,2* 10^12. Оставшиеся же кровяные пластинки нередко уменьшены в размерах (до 2/3 от нормальных значений), а также отличаются от эритроцитов нормальной собаки грубой, «извилистой» формой. Помимо этого, они плохо поддаются окраске. В хронических случаях попадаются ювенильные формы эритроцитов, с ядром.

При микроскопии хорошо видны кровяные пластинки с пироплазмами: они резко увеличены в размерах, имеют неправильную, неравномерную форму (впоследствии такие эритроциты лопаются, высвобождая возбудителей). В некоторых случаях при микроскопии можно заметить, как лейкоциты атакуют пораженные форменные элементы крови.

Лейкоцитоз же (т.е. увеличение числа лейкоцитов) при пироплазмозе – явление тоже распространенное, но не во всех случаях. А вот тромбоцитам приходится плохо: при пироплазмозе их количество уменьшается примерно в полтора или два раза, из-за чего сильно ухудшается свертываемость крови.

Пироплазмоз (Бабезиоз) - сезонное заболевание, переносчиком которого является клещ. Эти насекомые обитают не только в лесу, но и в городских скверах и парках. Заражение происходит, когда насекомое впивается хоботком в тело животного, и в рану попадает слюна клеща. О симптомах, диагностике и лечении пироплазмоза собак мы расскажем в этой статье.

Как распространяется пироплазмоз в организме собаки

Инкубационный период болезни варьируется от трех дней до трех недель и зависит от иммунитета животного и количества зараженных клещей, питавшихся на собаке.

Печень и почки собаки не успевают перерабатывать разрушенные клетки крови и начинают отказывать.

Какие симптомы пироплазмоза собак

Вялость, слабость, отказ от прогулок, отсутствие аппетита

Повышение температуры тела до 40-42градусов

Потемнение мочи до бурого цвета

Возможны расстройства пищеварения: понос и рвота

Слизистые оболочки бледные или желтушные

Помните! Если после нападения клеща в течение трех недель ваш питомец становится вялым и ничего не ест, нужно срочно показать собаку ветеринару и сдать анализ крови на пироплазмоз.

Диагностика пироплазмоза

Диагностика болезни проводится, комплексно оценивая клинические симптомы и следующие анализы:

· Мазок крови на обнаружение пироплазм (отрицательный результат требует переоценку методом ПЦР)

· ПЦР анализ крови на бабезиоз (более чувствительный и точный метод, чем исследование мазка крови)

· Общий анализ крови (снижение числа тромбоцитов)

· Общий анализ мочи (наличие гемоглобина) Необходимо учитывать, что отрицательный результат не гарантирует отсутствие заболевания, возможно бабезии не успели размножиться.

Положительный результат, при отсутствии клинических симптомов заболевания, не говорит о развитии острого бабезиоза. Это может означать носительство или хроническую форму болезни.

Анализы, проводимые лабораторией «Шанс Био» для диагностики пироплазмоза у собак:

Лечение пироплазмоза собак

В последствии действия лекарства ежечасно гибнет все больше пироплазм и разрушаются эритроциты, которые выводятся организмом через почки, закупоривая их и вызывая осложнение в виде почечной недостаточности.

Для полного выздоровления необходимо поддержать организм животного терапией, направленной на восстановление функции почек, печени, сердца.

В тяжелых случаях облегчить состояние животного поможет переливание крови.

В ветеринарном центре «Шанс Био» по решению врача переливание крови будет выполнено в кратчайшие сроки. Вам не понадобится никуда ехать и подбирать кровь именно вашей собаке. В лаборатории имеется собственный банк крови с соблюдением всех стандартов по заготовке и хранению донорской крови.

Профилактика

В качестве профилактики бабезиоза собак используются различные средства для защиты от клещей (ошейники, капли, спреи, таблетки). Подбор средства должен быть индивидуальным. Сроки действия условны и зависят от погодных условий и содержания животного. При дождливом сезоне промежуток времени защиты значительно сокращается. Так же стоит учесть, что препараты действуют не сразу. Нужно строго соблюдать правила нанесения - нельзя наносить средство на только что вымытое животное, а после обработки нужно не купать собаку два дня и стараться не попадать под дождь.

Важно! Помните ни одно средство стопроцентно не защитит вашего питомца от нападения клеща, поэтому после прогулки шерсть собаки необходимо регулярно осматривать и удалять ненапитавшихся клещей.

ЛАБОРАТОРНО-ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ЦЕНТР «ШАНС БИО» работает с 2006 г. Наши ветеринарные врачи имеют огромный опыт в диагностике и лечении пироплазмоза.

Многоступенчатый контроль качества анализов позволит точно и в кратчайшие сроки определить наличие или отсутствие инфекции.

Вы всегда можете заказать вызов ветеринарного врача на дом для взятия всех необходимых анализов.

Конечно, у каждого специалиста есть свои мнения и догадки относительно бабезиоза, но в отсутствии полноценной молекулярной диагностики они остаются только догадками и уделом меньшинства специалистов.

Таблица 1

			Вектор передачи	Географ. распростран.
Большой бабезиоз (пироплазмоз)	Babesia vogeli	Babesia canis vogeli	Rhipicephalus sanguineus	Широкое распространение
	Babesia canis	Babesia canis canis	Dermacentor spp.
	Babesia rossi	Babesia canis rossi	Haemaphysalis elliptica	Районы Сахары, Африка
	Babesia sp .	Неклассиф. Babesia sp .	Неизвестен	Северная Каролина, США
Малый бабезиоз (пироплазмоз)	Babesia gibsoni	Babesia gibsoni Азиатск. штамм	Haemaphysalis longicornis , собачьи бои	Азия, включая Японию
	B . conradae	B . conradae	Ixodes hexagonus	Запад США
	Theileria annae	Babesia microti -like	Ixodes hexagonus	Испания, Португалия Spanish isolate
	Theileria sp.	Неклассифиц. Theileria sp .	Неизвестен	Южная Африка
	Theileria annulata		Неизвестен	Африка, Европа, Азия
	Theileria equi	Babesia equi	Неизвестен	Африка, Европа, Азия

Большинство специалистов признают, по крайней мере, три возбудителя «малого» бабезиоза (пироплазмоза) у собак. Они отличаются по клиническим и генетическим характеристикам, это Babesia gibsoni , Babesia conradae . В другом исследовании бабезии (пироплазмы) были выделены от больных собак на западе США и описаны в оригинальном исследовании как B . gibsoni и Babesia microti —like , последняя позже идентифицирована как Theileria annae (табл. 1).

Кроме того, имеются сообщения о выделении из крови собак, больных бабезиозом, три разновидности Theileria . У небольшого числа собак в Европе были выделены Theileria (Babesia ) equi и Theileria annulata ; и у 82 собак в Южной Африке была выделена неклассифицированная Theileria sp — Южно-Африканская Theileria sp . .

При световой микроскопии интроэритроцитарные стадии Babesia spp . неразличимый от Theileria spp .

На сегодняшний день установлены зоны распространения бабезиоза собак, они перечислены в таблице 1; имеется всесторонняя и современная карта распространения клещевых инфекций собак Европы, Восточной и Юго-Восточная Азии . Как и ожидалось, географическое распространение клещевых инфекций полностью связано с географическим распространением клещей-переносчиков этих заболеваний. Интересно отметить, что распространение Babesia gibsoni не связано с распространением каких-либо клещей, и быстрое глобальное распространение этого возбудителя связано с его уникальной возможностью прямой передачи от больной собаки к здоровой через укусы, минуя какие-либо клещевые векторы .

На сегодняшний день Babesia vogeli является самой распространенной пироплазмой собак, что связано с широчайшим распространением вектора – коричневого собачьего клеща (Rhipicephalus sanguineus ) (табл. 1). Babesia vogeli распространена повсеместно, в тропических и субтропических областях, а также в более прохладных широтах, где кроме Babesia vogeli распространена другая большая бабезия – Babesia canis . Такое распространение часто приводит к микст-инфекциям. Babesia canis передается Dermacentor spp . и имеет все более и более широкое распространение в центральной Европе, тогда как совсем недавно считалось, что ее распространение ограничено Францией .

Babesia rossi преимущественно распространена в Африке (вместе с B . vogeli и B . gibsoni ). Первоначально этот агент был выделен только в Южной Африке, но на сегодняшний день есть сообщения о его выделении и в других регионах Африканского континента, включая Нигерию и Судан , где его распространяют клещи Haemaphysalis spp ., являющиеся энзоотичными для этих мест (табл. 1).
Среди малых бабезий наибольшее географическое распространение получила B . gibsoni . Методом молекулярной идентификации она была обнаружена в южных, восточных и юго-восточных азиатских странах, получив наибольшее распространение там, где практикуются незаконные собачьи бои.

Во всем мире иммуноферментный анализ на протяжении последних 30 лет был самым распространенным тестом на бабезиоз (пироплазмоз) собак . Однако неудовлетворительная специфика из-за перекрестных реакций между Babesia spp . и другими микроорганизмами Apicomplexa , вносили субъективность в окончательные результаты исследования и мешали крупномасштабному применению этих методик. С 2000 года для диагностики бабезиоза начал активно внедряться метод ПЦР.

Возможность ПЦР-диагностики в обнаружении ДНК бабезий (пироплазм) при хроническом течении заболевания можно улучшить, проверяя не один, а несколько образцов крови от подозреваемого животного .

Тяжесть течения бабезиоза у собак и кошек колеблется от субклинической инфекции, при которой развивается невыраженная анемия, до очень тяжелого течения заболевания с развитием синдрома мультиорганного расстройства и быстрой гибели. Факторами, определяющими тяжесть течения, являются вид пироплазмы, вызвавшей заболевание, порода собаки, а также особенности физиологического состояния животного, такие как возраст, иммунный статус, наличие микст- инфекций, а также преморбидное состояние животного. Все виды бабезий (пироплазм) могут вызвать лихорадку, анорексию, спленомегалию, анемию и тромбоцитопению в результате прямого повреждения и разрушения эритроцитов хозяина (гемолиз), снижения осмотической резистентности зараженных эритроцитов.

Клинические особенности бабезиоза были рассмотрены с разных сторон . При длительном наблюдении выявлено, что из всех больших бабезий Babesia vogeli является наименее патогенной, по крайней мере, у взрослых собак, и вызывает самые мягкие формы бабезиоза, часто развиваются хронические формы заболевания. А самой патогенной бабезией является Babesia rossi , выделенная в Африке .

У собак, зараженных Babesia rossi , часто развиваются различные осложнения. При этом такие как гепатопатия и иммунооблусловленный гемолиз утяжеляют течение заболевания, но не вызывают смерть, если должным образом проводится терапия. В то время как ДВС-синдром, энцефалиты, острая почечная недостаточность и отек легких требуют ранней и очень интенсивной терапии. При этом прогноз остается плохим . Напротив, бабезиоз (пироплазмоз), вызываемый Babesia vogeli , часто протекает субклинически, но у щенков в возрасте до 3-4 месяцев заболевание может быть фатальным (рис. 1-5).

Кроме того, бабезиоз (пироплазмоз), вызываемый Babesia vogeli , тяжело протекает у собак с иммунодепрессией, получающих химиотерапию по поводу онкологических заболеваний, после хирургических вмешательств, особенно после спленэктомии.

Тяжесть течения бабезиоза (пироплазмоза), вызванного Babesia canis , Babesia gibsoni , Theileria annae и Babesia conradae , колеблется от умеренного до тяжелого, но может наблюдаться широкий диапазон тяжести клинического состояния и осложнений в зависимости от индивидуальных особенностей животного (рис. 6) .

Клинико-патoлогическое исследование собак, пораженных Theileria annae на Северо-Западе Испании, показало, что у 36% собак (n = 58) отмечалась азотемия; у этих животных смертность была в 10 раз выше, чем у собак без азотемии. . К сожалению, в этих исследованиях не приведены данные, показывающие корреляцию тяжести заболевания с выраженностью азотемии, но высокий белок в моче, повышенный креатинин, гипоальбуминемия и гиперхолестеринемия у больных собак заставила авторов предположить, что наиболее вероятной причиной поражения почек у собак при инфекции Theileria annae является гломерулонефрит . Вместе с тем исследования уровня азотемии у собак, зараженных B . rossi , показали, что уровень креатинина и мочевины не являлся прогностическим показателем возникновения острой почечной недостаточности с плохим прогнозом . В недавних исследованиях эндокринных маркеров болезни установлено, что отмечается корреляция между высокой смертностью собак, больных бабезиозом, вызванным B . rossi , и высоким уровнем кортизола и АКТГ, при одновременно низком уровне T4 .

До сегодняшнего дня нет ясности в клинических последствиях носительства и хронического течения бабезиоза. Имеются данные как о тяжелом прогнозе для животных с таким течением бабезиоза, так и о полном выздоровлении. Имеются сообщения о том, что у большинства собак после незначительных клинических проявлений заболевания развивается преиммунное состояние, которое может закончиться иммуннообусловленными осложнениями или развитием клинического заболевания в более позднее время. Вместе с тем хроническая инвазия может вообще не иметь никаких последствий для собак, а в неблагополучных районах — даже приводить к устойчивости животных к пироплазмозу .

Имидокарба дипропионат и диминазин ацетурат являются широко используемыми антипироплазменными препаратами. Но в течение многих лет использовались и другие препараты с различным терапевтическим эффектом, например, такие как квинурониума сульфат, трипан синий, пентамидин, фенамидин, парваквон. В разных странах регистрационные комитеты ограничили применение многих из этих препаратов, так как некоторые (особенно диамидин – производное диминазина) ассоциированы с высокой токсичностью и многими побочными эффектами. В лучшем случае эти препараты приводили к улучшению клинических признаков и редко — к элиминации возбудителя из организма собаки .

Сообщается об экспериментальном заражении и последующей терапии 4 собак. Исследователи добились излечения собак, зараженных B. g ibsoni, по следующему протоколу: диминазин в комбинации с клиндамицином и метронидазолом (15 мг/кг каждые 12 часов) и доксициклином (5 мг/кг каждые 12 часов) . Успешным оказалась терапия этих собак также по следующему протоколу: азитромицин (10 мг/кг каждые 12 часов) и atovaquone (13.3 мг/кг каждые 8 часов) в течение 10 дней.

Эффективность лечения определялась по нормализации клинических признаков и отсутствию ДНК B . gibsoni в периферической крови, определяемой методом ПЦР. Десятидневный курс лечения заболевания, вызванного B . gibsoni , сопровождался клинической эффективностью и отсутствием побочных эффектов. Вместе с тем цена на atovaquoneограничивает применение этого препарата, особенно там, где он больше всего нужен, — в азиатских странах. Более дешевые формы atovaquone с proguanil вызывают тяжелые побочные эффекты со стороны ЖКТ у собак (доступность данных препаратов в РФ ограничена).

К сожалению, эта комбинация препаратов также не приводит к выздоровлению у некоторых собак, при этом быстро возникает устойчивость к atovaquone, вызванная мутацией гена b-цитохрома .

Профилактировать бабезиоз (пироплазмоз), как и любое другое векторное заболевание, проще всего, не допуская нападения клещей на собак, но достичь этого практически невозможно, особенно в эндемичных районах, несмотря на широкое применение репеллентных спреев и ошейников .

Несколько препаратов были исследованы с целью их профилактического применения против бабезий, и ни один не дал надежных результатов. В Европе наиболее часто применяется однократная доза имидокарба (имидокарба дипропионат) в дозе 6 мг/кг, которая защищает собак от B . canis до 8 недель, его действие усиливается при одновременном применении доксициклина в дозе 5 мг/кг в день, особенно против высокопатогенных B . canis . .

Все данные по распространению различных видов бабезий получены из зарубежной литературы и касаются распространения бабезиоза за пределами Российской Федерации. Данные по распространению различных видов бабезий в России в доступной отечественной литературе мы не нашли.

Все данные по распространению различных видов бабезий получены из зарубежной литературы и касаются распространения бабезиоза за пределами Российской Федерации. Данные по распространению различных видов бабезий в России в доступной отечественной литературе мы не нашли, что и определило цель нашего исследования.

Материал и методы исследования. Исследования были проведены на 100 собаках, поступивших в клиники Ростовской области в период с начала октября по конец ноября (2010 года).

Все собаки были клинически здоровы, и у них не ставился диагноз бабезиоз (пироплазмоз) за весь предшествующий весенне-летний период. У животных отбиралась и стабилизировалась EDTA кровь. Исследования на бабезиоз (пироплазмоз) проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией.

Анализ нуклеотидных полноразмерных геномов и участков различных генов бабезий, взятых из базы данных GenBank (NCBI) последовательностей, проводили с применением пакета прикладных программ «BioEdit 6.0». Исходя из нуклеотидного состава геномов бабезий разных видов, нами были выбраны участки 18S рРНК-гена, наиболее консервативные среди известных изолятов. На консервативные участки были рассчитаны родоспецифические праймеры BabspF (5’-GTTGCTTCTTAGAGGGACTTTGG-3’) и BabspR (5’-GCTCTAAGCCCTGAGGAAGTTTAAG-3’), фланкирующие участок в 282 пары нуклеотидов (п.н.).

Для идентификации вида бабезий исследовалась кровь от собак на присутствие видоспецифичных участков гена 18S рРНК. Исходя из диагностической ценности эксперимента для обнаружения кДНК конкретных видов бабезий, был выбран «стандартный» вариант ПЦР. С этой целью были сконструированы праймеры BrosF (5’-CTCACCAGGTCCAGACAAACG-3’) и BrosR (5’-GTAGGATTGACAGATTGATAGCTC-3’) к B . rossi , BcanF (5’-GATTCTTTGGGTGGTGGTGCATG-3’) и BcanR (5’-CGTTCTTAGTTGGTGGAGTGAT-3’) к B . canis и BvogF (5’-TGTCTGGTTAATTCCGTTAAC-3’) и BvogR (5’-GAACGAGACCTTAACCTGCTAACT-3’) к B . vogeli . Рассчитанные видоспецифичные праймеры для выявления кДНК имели высокую температуру отжига 62-64°С, это позволило объединить два этапа реакции (отжиг и элонгацию) в один. В результате удалось значительно снизить время постановки реакции, что не повлияло на её специфичность и чувствительность. Постановку ПЦР проводили в реакционной смеси стандартного состава с использованием 10 пкМ каждого праймера, 5 мкл раствора кДНК с добавлением 3 мM MgCl 2 .

Результаты исследования.
Нами были собраны клещи с территории Ростовской области с идентификацией их вида, результаты исследования занесены в таблицу 2.

Из таблицы видно, что наиболее ожидаемым видом бабезий, распространенным на территории Ростовской области, будет Babesia canis .

Таблица 2

Видовой состав иксодофауны Ростовской области

Виды иксодид	Количество особей				Виды бабезий, передаваемые клещами
Dermacentor marginatus					Babesia canis
Dermacentor pictus					Babesia canis
Hyalomma scupense					Theileria sp.
Hyalomma detritum					нет данных
Rhipicephalus sanguineus					Babesia vogeli
Ixodes ricinus					Babesia canis

Из 100 собак, у которых была отобрана кровь на носительство бабезиоза, у 12 был получен положительный результаты в реакции ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией (рис. 12). Таким образом, носительство бабезиоза в Ростовской области составило 12%. Наибольшее распространение бабезиоз (пироплазмоз) получил среди таких пород как немецкая овчарка, метисы и таксы, но, учитывая незначительное количество собак, возможно, эта тенденция отображает только высокую распространенность данных пород в Ростовской области. Чтобы точнее ответить на этот вопрос, потребуются дополнительные исследования.

Таблица 3

Распространение носительства бабезиоза по породам собак

Порода собаки	Номер исследования	Количество животных	Процент, %
Немецкая овчарка
Метис
Такса
Ротвейлер
Курцхаар
Русский спаниель
Лабрадор
Питбультерьер
Не указано

Нами были проведены дальнейшие исследования материала, положительного на наличие родовых генов к бабезиям. Все 12 положительных материалов были дополнительно исследованы в реакции ПЦР для определения вида возбудителя. Из 12 исследованных положительных материалов клинически здоровых животных положительный тест на B. canis оказался у 9 животных, номера исследования – 1, 7, 15, 28,29, 33, 35, 44, 56. Что составило 9 % от числа всех исследованных животных и 75% — от числа всех носителей. В 4 случаях тест оказался положительным на B . vogeli , номера исследования – 1, 15, 33, 35, что составило 4 % от числа всех исследованных животных и 33,3 % — от числа всех носителей. На B . rossi все пробы оказались отрицательными. При этом, как видно из рис. 7 и цифровых значений исследования, все животные, зараженные B . vogeli , были заражены и B . canis . Таким образом, в Ростовской области широко распространена микст-инвазия B . vogeli и B . canis .

Вместе с тем пробы 10, 39, 95 оказались отрицательными на B . vogeli , B . canis и B . rossi , что указывает, что в Ростовской области распространены не только эти бабезии (пироплазмы), но и другие виды. Мы планируем продолжить исследование и в ближайшее время представить материал о распространении всех видов бабезий на территории Ростовской области.

Выводы. Таки образом, на сегодняшний день бабезиоз (пироплазмоз) собак остается важной клинической проблемой, несмотря на серьезные достижения последних лет в понимании патогенеза этого заболевания. Остаются нерешенными проблемы передачи инфекции и ее патофизиологический механизм, много нерешенных вопросов в диагностике заболевания и терапии этой инвазии, открытыми остаются вопросы профилактики данного заболевания.

В настоящее время выделены неклассифицированные возбудители заболевания, не до конца выявлен ареал распространения, который, по всей видимости, будет продолжать расширяться из-за международного движения собак и расширения ареала клещей.

Носительство бабезиоза у собак в Ростовской области в конце периода передачи инвазии составляет 12 %, при этом инцидентность носительства B . canis составляет 9 % от числа всех исследованных животных, или 75% — от числа носителей, микст-инвазия B . canis и B . vogeli составила 4 % от числа всех исследованных животных, или 33,3 % — от числа всех носителей, в 25 % случаев идентифицировать вид бабезии (пироплазмы) не удалось.

Необходимо напомнить, что, по данным зарубежных авторов, носительство может приводить к аутоиммунным анемиям, поражениям почек и развитию фатальной почечной недостаточности. Поставить диагноз методом световой микроскопии таким животным невозможно, и при обычном исследовании в ветеринарной клинике такие диагнозы проходят как криптогенные, а гибель животных связывают с другими причинами.

Литература

1. Peter J Irwin, Canine babesiosis: from molecular taxonomy to control /4th International Canine Vector-Borne Disease Symposium Seville, Spain. 26–28 March 2009.
2. Kjemtrup AM,Wainwright K, Miller M, Penzhorn BL, Carreno RA: Babesia conradae, sp. nov., a small canine Babesia identified in California. Vet Parasitol 2006, 138:103-111.
3. Zahler M, Rinder H, Schein E, Gothe R: Detection of a new pathogenic Babesia microti-like species in dogs. Vet Parasitol 2000, 89:241-248.
4. Camacho AT, Pallas E, Gestal JJ, Guitiàn FJ, Olmeda AS, Goethert HK, Telford SR: Infection of dogs in north-west Spain with a Babesia microti-like agent. Vet Rec 2001, 149:552-555.
5. Criado-Fornelio A, Martinez-Marcos A, Buling-Saraña A, Barba-Carretero JC: Molecular studies on Babesia, Theileria and Hepatozoon in southern Europe Part I: Epizootiological aspects. Vet Parasitol 2003, 113:189-201
6. Matjila PT, Leisewitz AL, Ooshuizen MC, Jongejan F, Penzhorn B: Detection of a Theileria species in dogs in South Africa. Vet Parasitol 2008, 157:34-40.
7. Yamasaki M, Inokuma H, Sugimoto C, Shaw S, Aktas M, Yabsley MJ, Yamato O, Maede Y: Comparison and phylogenetic analysis of the heat shock protein 70 gene of Babesia parasites from dogs. Vet Parasitol 2007, 145:217-227
8. Birkenheuer AJ,Correa MT, Levy MG, Breitschwerdt EB:Geographic distribution of babesiosis among dogs in the United States and association with dog bites: 150 cases (2000-2003). J Am Vet Med Assoc 2005, 227:942-947.
9. Jefferies R, Ryan UM, Jardine J, Broughton DK, Robertson ID, Irwin PJ: Blood, bull terriers and babesiosis: further evidence for direct transmission of Babesia gibsoni in dogs. Aust Vet J 2007, 85:459-463.
10. 57. Lobetti RG, Jacobsen LS: Renal involvement in dogs with babesiosis. J Sth Afr Vet Assoc 2001, 72: 23-28.
11. de Scally MP, Lobetti RG, Reyers F, Humphris D: Are urea and creatinine values reliable indicators of azotaemia in canine babesiosis? J Sth Afr Vet Assoc 2004, 75:121-124.
12. Schoeman JP, Rees P, Herrtage ME: Endocrine predictors of mortality in canine babesiosis caused by Babesia canis rossi. Vet Parasitol 2007, 148:75-82.
13. Wulansari R,Wijaya A,Ano H, Horii Y, Nasu T,Yamane S, Makimura S: Clindamycin in the treatment of Babesia gibsoni infections in dogs. J Am Anim Hosp Assoc 2003, 39:558-562.
14. Suzuki K,Wakabyashi H,Takahashi M, Fukushima K,Yabuki A, Endo Y: A possible treatment strategy and clinical factors to estimate the treatment response in Babesia gibsoni infection. J Vet Med Sci 2007, 69:563-568.
15. Vercammen F, de Deken R, Maes L: Prophylactic treatment of experimental canine babesiosis (Babesia canis) with doxycycline. Vet Parasitol 1996, 66:251-255.

доктор биологических наук, профессор Карташов С.Н. ,
кандидат ветеринарных наук Ключников А.Г.

Вылечить животное не возможно без предварительно поставленного точного диагноза. Особенного внимания требуют те болезни, течение которых проходит скрыто, но животное при этом быстро «угасает». К таким заболеваниям относится и пироплазмоз. Диагностика пироплазмоза у собак уже давно отлажена, но существует множество нюансов, о которых нельзя забывать.

Заболевание вызвано простейшим. Ряд Piroplasmidеa включает несколько семейств, и каждый представитель вызывает клинику у определённого животного. Возбудитель пироплазмоза у собак относится к роду Babesia, а заболевание называется - бабезиоз. По старинке его называют пироплазмозом.

• в клетках крови собаки - простым делением на два;
• в теле клеща - множественным делением (шизогонией).

Возбудитель микроскопичен. Рассматривая его в эритроците можно видеть, что он больше радиуса и захватывает центр клетки.

• жизнеспособность;
• вирулентность;
• возможность размножаться;
• при диагностике хорошо прокрашивается, будучи замороженной более 2-х лет.

Собака может заразиться в случае:

• низкой резистентности организма;
• при большом количестве клещей;
• при частом контакте с членистоногими.

Нужно учитывать:

• Если фагоцитарная активность организма собаки высока, и ферментативная система не даёт сбой - животное не имеет шансов заболеть. (Иммунитет - залог благополучия);
• Не каждый клещ несёт угрозу, а только тот который содержит пироплазму.

Пироплазмоз заболевание специфическое. Клещ заражается от собаки, собака от клеща. Но, если поражение эритроцитов бабезиями у животного менее 1% (начальная стадия болезни)- клещу ничего не угрожает.

Клещ-переносчик засыпает на зиму. Пироплазма в это время претерпевает ряд изменений и весной, просыпается вместе с хозяином.

Укусив собаку, инфицированный клещ заражает её и это проявляется следующими симптомами:

• повышение температуры (удерживается 3-4 дня, далее нормализуется);
• моча имеет розово-красный иногда бурый цвет (кровавая);
• слизистые оболочки бледные (анемичные) затем приобретают желтизну;
• животное угнетено;
• аппетит понижен или отсутствует.

Если признаки стёрты, заболевание может перейти в хроническую форму. Животное будет:

• худеть;
• чувствовать себя угнетённым;
• слизистые оболочки приобретать попеременную бледность и желтушность;
• отказываться от корма.

Иногда самочувствие будет восстанавливаться, но со временем признаки вновь проявятся. Если течение лёгкое, то после подъёма температура понижается, аппетит восстанавливается, моча становится светлой и животное выздоравливает.

Диагностика заболевания основывается на:

• эпизоотологических данных;
• клинической картине;
• результатах лабораторных исследований.

Общий анализ крови

Диагностику можно провести и при взятии периферийной крови непосредственно у животного и немедленной покраске. Методика проведения анализа такова:

• Кожу внутренней поверхности ушной раковины собаки протирают спиртом;
• Место прохождения видимого капилляра надсекается;
• Предметное стекло прикладывается к каплям крови;
• Формируется тонкий мазок;
• Проводится покраска по Романовского-Гимза;
• Исследуется под микроскопом.

В поле зрения микроскопа отлично просматриваются эритроциты, окрашенные в розовый цвет. Если собака больна, то в центре эритроцита будет отчётливо видно пироплазмы в виде грушеобразных включений.

При общем анализе крови, показатели которые подтвердят диагноз пироплазмоз, будут следующие:

• эритроциты - количество уменьшится вдвое;
• гемоглобин - понизится на 30-35%;
• скорость оседания эритроцитов - увеличиться почти в три раза;
• лейкоциты - количество понизится.

Будет также выявлен:

• анизоцитоз . В здоровом организме нормоцитов (нормальных эритроцитов) 70 %, а мелких (не сформированных, разного размера) 30%. При патологии мелкие эритроциты будут составлять более 50%;

• пойкилоцитоз (деформирование эритроцитов). Если в норме они круглые, то при патологии видоизменяются и становятся овальными, приплюснутыми, серповидными, зигзагообразными;

• полихроматофиллию. Под действием красителя, в норме, эритроциты окрашиваются одинаково, однотонно. При патологии клетки будут иметь разную степень окраски.

Для определения состояния животного и назначения поддерживающей терапии прибегают к исследованиям крови с развёрнутой формулой.

При пироплазмозе выявляют:

• моноцитоз (повышенное содержание моноцитов в крови). Моноциты (разновидность лейкоцитов) образовываются в организме для фагоцитарной борьбы с инфекцией и инвазией и являются своеобразными защитниками;
• тромбоцитопинию (пониженное содержание тромбоцитов в крови).

Клинический анализ крови

Не маловажным исследованием крови является и биохимический анализ. При пироплазмозе выявляют:

• повышенное количество билирубина, что свидетельствует о разрушении эритроцитов и освобождении гемоглобина, который в печени распадается;
• повышенный уровень мочевины, это указывает на нарушение экстракции в почках;
• повышение креатина. Показатель, свидетельствующий о патологии почечных клубочков;
• повышение уровня альфа амилазы. Это свидетельствует о почечной недостаточности.

Проводя исследования крови при пироплазмозе, следует учесть, что такие показатели как общий белок и глюкоза всегда остаются в норме.

Нередко для диагностики пироплазмоза используется ПЦР (полимеразная цепная реакция). Этот метод очень специфичен и высокоточный, но применим при начальных стадиях заболевания. После проведённого лечения, когда в крови уже нет возбудителя, но остаются его следы (генетический материал) реакция даёт положительный результат. Если ПЦР проводится в начале патологического процесса, то это даёт возможность быстро установить диагноз, назначить лечение и провести терапию.

Важно! При диагностике нельзя полагаться на какой-либо один метод. Только комплексное исследование клинических признаков в тандеме с лабораторной диагностикой может привести к быстрой постановке точного диагноза.

Анализ мочи

При поражении эритроцитов пироплазмами гемоглобин и билирубин попадает в мочу. Гемоглобин окрашивает её в красный цвет, билирубин в тёмно-жёлтый, бурый. Как правило, полный анализ мочи не проводится, а определяются физические свойства (цветность).

Основной задачей анализа является выявление уробилиногена. В норме он составляет 17 мкмоль/л. При распаде эритроцитов уровень значительно повышается.

Большого внимания на анализ мочи не обращают ввиду того, что уробилинген может проявляться при поражениях печени, энтеритах, заболеваниях жёлчного пузыря, запорах. Кроме того, исследование мочи должно быть проведено на протяжении 3-х часов после отбора при условии транспортировки при температуре 2-4 ᵒC.